服务介绍:
高分辨液质联用是在高效液相色谱的基础上串联具有高选择性和高分辨能力的质谱仪作为检测器,那么在方法开发及优化过程中,除了对色谱条件进行摸索确认,还需要对质谱条件进行摸索确认,包括离子源,扫描模式,电压,温度,离子对等,使得仪器能对复杂基质中的分析物进行检测。
多指标定量检测的方法学开发的目的就是提高分析灵敏度,降低干扰,获得好的重现性,以达到准确测定生物基质中的药物浓度。PRM(平行反应监测, Parallel Reaction Monitoring),多指标靶向定量,是一种基于高分辨、高精度质谱的靶向定量技术,能够对目标化合物进行选择性检测,从而实现对目标化合物的精准定量。其基本原理是:四级杆(Q)首先选出的目标化合物监测离子,进入碰撞室中打碎后,所有的碎片离子经过质量分析器产生一张高分辨的二级质谱图,通过提取其中的碎片离子信息即可实现目标化合物的定量。
主要设备:色谱仪Thermo UltiMate 3000 RS,质谱仪 Thermo Q Exactive
货号 | 名称 | 规格 | 价格(元) |
GA1166 | 多指标高分辨质谱方法学开发 | 个 | 5000起 |
实验结果展示:
1、仪器信息
2、标准曲线
3、总离子流图
4、定量下限谱图
实验流程:
标准品配制-确定质谱条件-确定色谱条件-确定检测下限-验证线性范围
含真实样本的方法开发:报告提供方法检测下限,线性范围(根据真实样本调整),样品检测结果,详细色谱质谱条件,不做多基质条件的摸索。
不含真实样本的方法:报告提供方法检测下限,上下限的倍数关系,详细色谱质谱条件,不做基质条件的摸索。
对比常规液质联用的含量检测,常规液质采用三重四级杆液质联用是使用SRM数据模式,高分辨质谱则应用PRM靶向检测模式,在单针检出物峰容量、化合物峰定性准确度以及检测下限等方面具有显著优势,特别是在在面对单针30+化合物的检测时具备其他检测模式不可替代的通量优势。
送样运输要求:
1、标准品
①客户提供标准品粉末,每个指标20mg左右;如果为溶液,需要提前和实验室沟通浓度和用量。
②如需要代购,具体费用和货期另外咨询。
③保存条件参考标准品瓶身标签,常见是4℃或-20℃保存。
2、内标物(不算入收费指标)
①客户未指定内标的情况下,实验室常规采用外标法进行定量。
②客户若指定内标,需要同时提供相应的内标物20mg左右;如果为溶液,需要提前和实验室沟通浓度和用量。
③如需要代购,具体费用和货期另外咨询。
④保存条件参考内标瓶身标签,常见是4℃或-20℃保存。细胞量1x107个,收集细胞沉淀,-80℃保存,纯干冰运输,避免反复冻融。
②收集时,用预冷PBS缓冲液清洗三次,去除培养基成分,然后离心去除上清保存。
③如需要进行细胞计数,则需送样前进行。